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本項(xiàng)目的特異性靶向多肽篩選主要運(yùn)用了細(xì)菌多肽展示技術(shù)以及流式細(xì)胞技術(shù)。細(xì)菌多肽展示是一種蛋白質(zhì)工程技術(shù),可以在體外研究多肽與腫瘤特異性分子或者特定類(lèi)型的腫瘤細(xì)胞的相互作用。通過(guò)基因工程技術(shù),把編碼不同的多肽序列的核酸序列轉(zhuǎn)入到細(xì)菌中,使多肽連接到細(xì)菌表面的骨架蛋白上,形成一個(gè)融合蛋白一起表達(dá)出來(lái)。而流式細(xì)胞儀作為一種高通量的檢測(cè)和分選的儀器,在很短時(shí)間里能夠完成對(duì)目標(biāo)樣品的分析和收集。把流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)菌多肽展示技術(shù)結(jié)合在一起,進(jìn)行熒光激活細(xì)胞分選。把靶細(xì)胞或靶分子與表達(dá)隨機(jī)多肽序列的細(xì)菌庫(kù)(表達(dá)綠色熒光蛋白)進(jìn)行孵育,通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè),并分選出帶有熒光的細(xì)胞或分子,通過(guò)多輪的分選與富集,最后得到能夠與靶細(xì)胞或靶分子特異性結(jié)合的多肽序列。
利用篩選得到的多肽進(jìn)行更深入的研究與商業(yè)化產(chǎn)品的開(kāi)發(fā),主要有以下五點(diǎn):1)基于靶向多肽的微流控芯片檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞;2)腫瘤干細(xì)胞特異性結(jié)合多肽的篩選及應(yīng)用;3)PD-1、PD-L1靶向多肽的篩選及腫瘤免疫相關(guān)研究;4)蛋白酶底物序列的篩選確定與應(yīng)用。5) 將納米技術(shù)與多肽相結(jié)合,設(shè)計(jì)、構(gòu)建具有特異性靶向作用的納米藥物以及此納米藥物的生物效應(yīng)檢測(cè)。
材料科學(xué),生物醫(yī)用 500萬(wàn)以上
化學(xué)化工
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